球虫病是由艾美耳球虫属引起的家禽疾病，对家禽的生产性能影响很大，临床上多种艾美耳球虫混合感染很常见。为延缓耐药性产生，泰国规模化肉鸡场普遍采用穿梭给药方案：育雏期使用化学合成抗球虫药，生长期更换离子载体类抗球虫药。但临床和亚临床球虫病仍然频繁发生，耐药问题日趋严峻。近期发表于《国际兽医学》的一项研究，揭示了穿梭用药模式下球虫的耐药真实状况。

1、球虫种类

从泰国东部多家规模化肉鸡场采集的混合粪便样本中，分离出堆型、巨型和柔嫩艾美耳球虫。

2、试验动物选择及试验设计

选用112只1日龄Ross 308雄性肉鸡，按照平均体重随机分为4组，每组4个重复，每个重复7只鸡。试验分组设置如下：

(1)未感染未用药组（UUC，T1）：饲喂基础日粮，不接种艾美耳球虫；

(2)感染未用药组（IUC，T2）：饲喂基础日粮，并接种艾美耳球虫；

(3)T3组：育雏料每吨添加40 ppm尼卡巴嗪+40 ppm那拉菌素，生长料添加70 ppm盐霉素，接种艾美耳球虫；

(4)T4组：育雏料每吨添加40 ppm尼卡巴嗪+40 ppm那拉菌素，生长料添加5 ppm马杜霉素，接种艾美耳球虫。

21日龄时称重，记录初始体重，并佩戴脚标用于个体识别。随后，将含有2×10⁵个堆型艾美耳球虫孢子化卵囊、1×10⁵个巨型艾美耳球虫卵囊和1.5×10⁴个柔嫩艾美耳球虫卵囊的悬浮液，按1mL 直接经口灌入鸡的嗉囊中进行接种。未用药的对照组不感染，仅给予等量蒸馏水。

每天监测鸡只的死亡情况，收集死亡鸡只进行尸检并称重。在感染后第6天（6DPI），采集所有鸡只的粪便样本，计算每个重复组的平均每克粪便卵囊数（OPG）。将粪便样品在饱和氯化钠溶液中稀释，然后使用麦克马斯特计数板在显微镜下进行卵囊计数。在感染后第7天，从每个重复组中取4只鸡（即每组共16只）进行称重，并通过颈椎脱臼法实施安乐死，以采集肠道样本，对肠道病变评分进行评定。

3、耐药性评估指标

（1）POAA（最优抗球虫活性百分比）

POAA=（感染用药组GSR−感染未用药组GSR）/（未感染未用药组GSR−感染未用药组GSR）×100%

此处，GSR（生长存活率）=最终体重/初始体重

判定标准：POAA＞50%，敏感；POAA≤50%，耐药

（2）ROP（相对卵囊值）

ROP=（感染用药组卵囊排出量/感染未用药组卵囊排出量）×100

判定标准：ROP＜15%，敏感；ROP≥15%，耐药。

（3）RLS（病变记分降低率）

RLS=（感染未用药组平均病变评分−感染用药组平均病变评分）/感染未用药组平均病变评分×100%

判定标准：RLS≥50%，敏感；RLS＜50%，耐药。

（4）ACI（抗球虫指数）

ACI=（相对增重率+存活率）−（病变评分+卵囊值）

卵囊值=（感染用药组粪便卵囊数）/（感染未用药组粪便卵囊数）×100%

判定标准：ACI≥160，敏感；ACI＜160，耐药。